p300基因小干扰RNA慢病毒载体的构建及其对乳腺癌ZR75-1细胞的影响

目的:构建p300基因的小干扰RNA(siRNA)慢病毒表达载体,检测其对p300蛋白表达的干扰,以及对乳腺癌细胞ZR75-1生长的影响。方法:利用RNA干扰(RNAi)技术设计并合成针对p300基因的siRNA,并将其克隆到siRNA表达载体pSIH-H1上,经酶切和测序验证,用293T人胚肾细胞包装p300 siRNA慢病毒,感染乳腺癌细胞ZR75-1,建立敲低p300表达的稳定细胞株,通过实时定量PCR和Western印迹检验RNAi的干扰效果,利用细胞生长实验检测p300 siRNA对ZR75-1细胞生长的影响。结果:酶切和测序证明构建了p300 siRNA真核表达载体;实时定量PCR和Western印迹证明构建的siRNA能有效抑制p300基因的表达,并建立了敲低p300表达的稳定细胞株;细胞生长实验证实p300 siRNA可有效促进ZR75-1细胞的生长。结论:构建了p300基因的siRNA真核表达载体,转染细胞后能有效抑制p300基因的表达,且能促进ZR75-1细胞的生长,表明构建的p300 siRNA具有功能。     

胃癌患者围术期血清TNF-α, NO及IGF-Ⅱ水平变化及意义

摘要 目的：探讨胃癌患者围手术期血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、一氧化氮（NO）及胰岛素样生长因子-II（IGF-II）水平的变化及其临床意义。方法：收集2014年8月至2016年8月于我院收治的117例行胃癌根治术的胃癌患者（病例组）,随机选取的60例健康体检者（对照组）为研究对象,采用酶联免疫测定法（ELISA）测定两组的血清TNF-α水平,硝酸还原法测定NO水平,双抗体放射免疫法测定IGF-II水平。结果：病例组患者术前血清TNF-α、IGF-II水平均高于对照组,NO水平低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。病例组术后3 d、7 d、10 d血清TNF-α、IGF-II水平均呈逐渐下降趋势,且均低于术前,差异有统计学意义（P<0.05）,术后10d血清TNF-α、IGF-II水平与对照组比较无差异（P>0.05）;而血清NO水平在术后3 d、7 d、10 d均呈逐渐上升趋势,且均高于术前,差异有统计学意义（P<0.05）,术后10d血清NO水平与对照组比较无差异（P>0.05）。经Pearson积矩相关分析,术前病例组患者TNF-α、IGF-II之间呈正相关关系（r=0.733,P<0.05）,TNF-α、IGF-II与NO之间均呈负相关关系（r=-0.681、-0.716,P<0.05）。结论：胃癌患者术前血清TNF-α、IGF-Ⅱ呈高表达,NO呈低表达,术后随着时间的延长,TNF-α、IGF-Ⅱ、NO逐渐趋于正常,联合检测围手术期血清TNF-α、NO、IGF-Ⅱ有助于早期评估胃癌病情及判断预后。     

肝门部胆管癌根治术术后口服胆汁患者的疗效观察

目的:探讨肝门部胆管癌术后口服胆汁患者的疗效。方法:采用病例对照法,回顾性分析2015年10月-2016年9月期间我科收治的肝门部胆管癌患者,术前行经皮肝穿刺胆道引流术(PTCD)并接受肝门部胆管癌根治术的患者89例,根据术后是否口服胆汁,将肝门部胆管癌患者分为两组,即口服胆汁组(51例)及对照组(38例)。所有患者均为术后3日开始进食。口服胆汁组:胆汁口服应遵循的条件为引流出的胆汁呈金黄色、无血性。术后第三天,胆汁满足口服的条件时,每6小时收集一次,经双层纱布过滤,胆汁中加入蜂蜜少量多次、随餐服下。对照组:除外口服胆汁,其余进食及治疗均相同。术后主要结局观察指标包括腹泻发生率、术后7天血清白蛋白水平,腹腔感染发生率;次要结局指标即住院时间。观察术后患者腹泻发生率、术后7天血清白蛋白水平,腹腔感染发生率和住院时间。结果:两组患者腹腔感染、腹泻发生及住院时间有统计学差异,p值均小于0.05,两组间白蛋白水平无统计学差异。结论:口服胆汁是一种有效、简便且经济的方法。术后腹腔感染并发症少,缩短住院时间,腹泻发生率较低。     

乳腺浸润性导管癌组织IRS1、PRSS3蛋白表达与磷酸化蛋白激酶B表达和预后的关系研究

摘要 目的：探讨乳腺浸润性导管癌（BIDC）组织胰岛素受体底物1（IRS1）蛋白、丝氨酸蛋白酶3（PRSS3）蛋白表达与磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）表达以及预后的关系。方法：选择2017年1月至2018年12月我院收治的363例BIDC患者,采用免疫组化法检测经手术切除的BIDC癌组织和癌旁组织中IRS1蛋白、PRSS3蛋白以及p-AKT表达,比较BIDC不同病理特征IRS1蛋白、PRSS3蛋白表达差异。Spearman秩相关分析IRS1蛋白、PRSS3蛋白表达与p-AKT表达的相关性。术后定期随访,采用Kaplan-Meier生存分析、Cox风险比例回归分析IRS1蛋白、PRSS3蛋白表达与BIDC患者预后的关系。结果：BIDC组织中IRS1蛋白、PRSS3蛋白、p-AKT阳性表达率分别为68.87%、58.13%、68.04%,均高于对照组的46.56%、40.50%、41.60%（P＜0.05）。IRS1蛋白表达、PRSS3蛋白表达与p-AKT表达均呈正相关（rs=0.805、0.796,P＜0.05）。肿瘤直径＞2 cm、低中度分化、AJCC分期为Ⅱ期的患者IRS1蛋白阳性表达率高于肿瘤直径≤2cm、高度分化、AJCC分期为Ⅰ期的患者（P＜0.05）,AJCC分期为Ⅱ期、HER-2阳性表达、Ki-67阳性表达的患者PRSS3蛋白阳性表达率高于AJCC分期为Ⅰ期、HER-2阴性表达、Ki-67阴性表达的患者（P＜0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示IRS1蛋白、PRSS3蛋白阳性表达者PFS生存率、OS生存率低于IRS1蛋白、PRSS3蛋白阴性表达者（P＜0.05）。多因素COX风险比例回归结果显示AJCC分期Ⅲ期、IRS1蛋白阳性表达、PRSS3蛋白阳性表达是BIDC患者预后不良的危险因素（P＜0.05）。结论：BIDC癌组织中IRS1蛋白、PRSS3蛋白阳性表达率增高,IRS1蛋白、PRSS3蛋白可能通过调节p-AKT参与BIDC癌症进展过程。     

瑞舒伐他汀对颈动脉粥样硬化患者单个核细胞CCR2表达的影响及机制

目的：探讨瑞舒伐他汀对颈动脉粥样硬化患者单个核细胞CC类趋化因子受体2（CCR2）表达的影响及上游机制。方法：选择颈动脉粥样硬化患者20例。予瑞舒伐他汀5~20 mg/d治疗。在基线、3月时采集血标本,测定单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及血脂水平;分离单个核细胞,流式细胞学检测单个核细胞上的CCR2表达;荧光定量逆转录PCR法检测CCR2、过氧化物酶体增生物激活受体（PPAR）β mRNA的表达;Western印迹法检测PPAR β蛋白的表达。结果：瑞舒伐他汀治疗3个月后,患者低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平明显降低（P<0.01）,MCP-1及单个核细胞CCR2表达显著下降（P<0.05）,PPAR β mRNA及蛋白表达均较前增加（P<0.05）。结论：瑞舒伐他汀可能通过PPAR β途径降低MCP-1,抑制单个核细胞CCR2的表达。     

胃癌的过继性免疫治疗研究进展

胃癌是目前世界上发病率及致死率较高的恶性肿瘤之一,在东亚地区尤其显著。针对胃癌的治疗手段仍是传统的手术联合化疗、放疗为主,尽管靶向药物治疗提供了新的选择,但其对晚期胃癌的疗效仍然有限。胃癌的免疫治疗作为独特的治疗手段,在近十多年发展较为活跃,特别是过继性免疫治疗手段不断有创新。过继性免疫治疗主要依赖回输具有抗肿瘤活性的细胞,目前回输的细胞由具有非特异性抗肿瘤作用向具有特异性抗肿瘤作用演变,特别是嵌合性抗原T细胞治疗的出现,为进展期胃癌患者提供了有一种潜在的选择。本文对胃癌过继性免疫治疗中采用的不同免疫活性细胞的作用机制、临床应用等进行总结,并针对其不足提出利用基因工程技术增强治疗靶向性、降低免疫逃逸的研究方向。     

JS-K抗肿瘤效果机制的研究进展

研究显示一氧化氮(NO)在体内参与多种信号通路的传导,在机体的肿瘤形成等多种病理和生理过程中发挥着重要作用。谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)在很多肿瘤的表达都是升高的,在肿瘤细胞中发挥着维持氧化还原平衡、解毒和促使肿瘤细胞发生耐药等方面的的作用;而JS-K是近年来新合成的一种一氧化氮(NO)前体药,其可以在体内被谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)酶解生成NO,进而发挥抗肿瘤效应。研究显示JS-K对机体的多种肿瘤都表现出明显的抑制作用,而对正常的组织则没有明显的损伤作用。由于肿瘤的组织来源不同,JS-K表现出的杀伤肿瘤的机制也不尽相同。本课题组通过广泛的文献阅读,系统地综述JS-K杀伤各系统肿瘤的作用机制,为JS-K杀伤肿瘤的进一步的机制研究提供一些有益的思路,和为将来JS-K的临床应用提供理论基础。